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自诱导培养基
服务编号:K03
名称:细菌自动识别OD启动诱导型培养基
规格: 500ml
价格: 180 元
Willget 自诱导培养基
                                                                         
      在LB培养基基础上改进而成,无需加入IPTG诱导,通过菌体生长到一定密度时,培养基中产生的代谢产物进行自发诱导,本培养基可使菌体密度提高3-5倍。不仅适合蛋白大量表达,还适合重组表达克隆的快速筛选。本培养基是已灭菌的10倍浓缩液,使用时将本浓缩液稀释10倍作为工作液,本培养基不含任何抗生素,使用时请按实验需要加入特定抗生素。
 
产品包装:
 10Х自诱导培养基    50ml          室温或4ºC保存,有效期2年
 
蛋白表达操作说明:
1.    在无菌器皿中,取出一定量的10Х自诱导培养基,用无菌的去离子水将本培养基稀释10倍作为工作液。
(如果操作不能保证无菌,可将稀释后的工作液,于115ºC灭菌20分钟)
2.    按试验需要加入特定的抗生素。
3.    用无菌牙签或枪头挑起一个单菌落,接入该工作液(工作液体积不限)。
4.    于37ºC摇床,最大转速,培养24h~30h。(也可于25ºC摇床,最大转速,培养24h~30h,低温有利于蛋白的可溶性表达,但表达量有所降低。)
5.    离心收集菌体。可取小样跑胶验证表达情况。
 
重组表达克隆快速筛选:
1.    在无菌器皿中,取出一定量的10Х自诱导培养基,用无菌的去离子水将本培养基稀释10倍作为工作液。
(如果操作不能保证无菌,可将稀释后的工作液,于115ºC灭菌20分钟)
2.    按试验需要加入特定的抗生素。
3.    将上述工作液分配在96孔板,或PE管中(1.5ml或2ml的PE管),每孔或每管分配50ul。
4.    用无菌牙签或枪头挑起一个单菌落,接入这些孔或者管中,盖上盖。
5.    于37ºC摇床,最大转速,培养16h~24h。
6.    不必离心,直接加入loading buffer,80ºC-100ºC孵育5-10min。
7.   通过page胶进行检测,(page胶染色可使用willget的page胶8分钟染色脱色液)

 
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网址: www.willget.cn    邮箱:willget001@aliyun.com    电话: 86 021-63033369
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