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ELISA无背景封闭液
服务编号:H04
名称:ELISA无背景封闭及抗体稀释液
规格: 100ml
价格: 360 元
ELISA无背景封闭及抗体稀释液
 
      文渊阁开发的ELISA无背景封闭及抗体稀释液,是传统BSA或奶粉封闭液的替代品,室温放置不会变质,只需5分钟室温封闭,即可实现无背景。此封闭液使得传统ELISA洗板流程得以简化,不必使用TWEEN20等表面活性剂,直接用去离子水漂洗即可。
      附送的TMB显色液是目前HRP显色底物中最安全和最灵敏的显色底物,一般的市售类似产品需要两管用前混合,文渊阁开发了一管式即用型TMB显色底物,并使其灵敏度相比传统产品进一步提高,无背景封闭液联合一管式TMB,可省去传统的硫酸酸化终止反应,在底物反应15-20分钟后,直接在OD595波长下进行读数。
 
试剂包装及储存:
ELISA无背景封闭及抗体稀释液       100ml
一管式TMB显色底物(附送)         20ml          
室温运输,  4℃保存一年
 
操作步骤:
1,       将抗原用PBS稀释至5ug/ml, 在elisa板的每孔中加入200ul,室温放置2h,或4℃过夜,甩掉孔中包被抗原
2,       用去离子水将elisa孔注满后甩掉去离子水,
3,       重复步骤2,2次
4,       在EP管中加入90ul无背景封闭及抗体保存液,加入10ul一抗,用移液枪混匀。
5,       在elisa板中每孔加入200ul无背景封闭液,室温封闭5分钟。
6,       取ep管中的一抗100ul加入elisa板的第一孔
7,       用移液枪(100ul)反复洗吹第一孔中的液体20次进行混匀
8,       混匀后吸取第一孔液体100ul转移至第二孔中,如同步骤7一样进行混匀,混匀后吸100ul转移至第三孔,如此便形成了一抗从1:30的第一孔至之后孔的3倍倍比稀释,另外弃去最后一孔100ul
9,      将elisa板转移至37℃,孵育2h
10,     甩掉elisa板一抗,用去离子水将每孔注满后,甩掉残余水,如此反复洗6次
11,     将二抗按1:200到1:1000,稀释于无背景封闭及抗体稀释液,混匀,每孔加入180ul
12,     将elisa板转移至37℃,孵育1h
13,     重复步骤10,进行洗板
14,     每孔加入200ul一管式TMB显色底物,将elisa板转移至37℃,孵育15min-20min
15,     不必按传统方法进行硫酸酸化,可直接在OD595波长下进行读数。
 
     (不加一抗只加二抗的孔可作为阴性对照,阴性对照值的2倍可作为cutoff值,高于此值的稀释倍数即为elisa效价)
 
 
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