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服务编号:P11
名称:任意规格预制胶自制试剂盒
规格: 1 kit
价格: 360 元
 

任意规格预制胶自制试剂盒

   

文渊阁的预制胶目前均是10cmX8cm尺寸(与美国BIORAD公司mini预制胶尺寸一致),12孔,1mm凝胶,如果您需要高分辨率,可长久保存的其他规格(厚度,孔数,尺寸)的SDS-PAGE凝胶,您只需要用手边的玻璃板,按照原有的配胶方法进行,只是将其缓冲液成分换成本预制胶制备缓冲液即可。

文渊阁的预制胶缓冲液,与传统的TRIS缓冲液不同,传统缓冲液分离胶为PH8.8TRIS-HCL溶液,而浓缩胶为PH6.8TRIS-HCL溶液,而聚丙烯酰胺在碱性环境下会逐步水解为聚丙烯酸,此聚合物带负电荷,所以会影响电泳。文渊阁的预制胶缓冲液为中性PH,并加入稳定剂,这样聚丙烯酰胺稳定性大大增强,用此缓冲液配置的预制胶在室温条件下可放置一年。电泳及转膜缓冲液兼容传统tris-glycine缓冲液,电泳转膜操作与传统操作一致。

 

试剂盒组分:

10ⅹ预制胶缓冲液          100ml   

50%丙烯酰胺溶液           50ml   (丙烯酰胺与甲叉丙烯酰胺的比例29:1,含1x预制胶缓冲液)

过硫酸铵干粉              10ml

TEMED                     800ul

Mini型预制胶包装袋       100

      本试剂盒支持室温运输,长期保存需置客户需置4°C,保存期1年。

 

使用说明:

A,分离胶液及浓缩胶液及过硫酸铵溶液配制

1,将10x预制胶缓冲液全部倒入1000ml试剂瓶中,加入900ml去离子水,配制成1x预制胶缓冲液的工作液。长期存放需置4°C

2,在装有过硫酸铵干粉的管中加入10ml去离子水,盖上盖子,上下颠倒溶解10秒钟,即获得过硫酸铵溶液。长期存放需置-20°C

3,按照以下比例配置分离胶和浓缩胶(以10ml示范,其它体积成比例增减)

15%

12%

10%

8%

6%

4%(浓缩胶)

50%丙烯酰胺溶液

3ml

2.4ml

2ml

1.6ml

1.2ml

0.8ml

1x预制胶缓冲液

7ml

7.6ml

8ml

8.4ml

8.8ml

9.2ml

10%过硫酸铵溶液

100ul

100ul

100ul

100ul

100ul

100ul

TEMED

4ul

4ul

4ul

6ul

8ul

10ul

 

B,预制胶制备

以制备一块BIO-RADmini胶(1mm)为例,其他大小和数量的胶按比例增加相应试剂)

1,将玻璃板固定好,并确定不会漏胶(可先用去离子水装入,检查漏胶情况,如果不漏,将板中去离子水倒掉,残余的的微量水滴不影响制胶操作)。

2,取4ml分离胶液,加入到配胶的玻板之间,并其上层加入0.5ml无水乙醇,静置30-50分钟至胶凝固。倒去上层乙醇。

3,取2ml浓缩胶液,加入两玻璃板之间,加上梳子室温放置30-50分钟至胶凝固。

4,制备好的胶可即刻使用,也可以将制备好的胶连同玻璃板和梳子,装入到本试剂盒自带的mini型预制胶包装袋,厚自封袋,或其他致密性较好的塑料袋中,加入5-8ml1x预制胶缓冲液的工作液,并用封口机封口(保证水分不外泄),此凝胶可在室温保存一年。

 

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